野生动物学报 (Feb 2025)
利用荧光素酶报告基因法研究转录因子USF1结合调控马鹿<italic>MicroRNA PC</italic>-<italic>5p</italic>-<italic>4811</italic>基因启动子机制
Abstract
为了探究转录因子上游刺激因子1(USF1)调控马鹿(Cervus elaphus)microRNA PC-5p-4811(miR-4811)基因转录的机理,综合运用核心启动子和转录因子结合位点生物信息学预测分析、基因克隆、点突变和双荧光素酶报告基因法等技术研究USF1结合miR-4811启动子分子机制和功能。结果显示:(1)截切突变证实马鹿miR-4811基因的核心启动子位于上游-3 174 ~ -2 966 bp;(2)转录因子USF1在-3 378 ~ +73 bp区域共有2个DNA结合位点(-3 046 ~ -3 031 bp、-3 045 ~ -3 018 bp),均位于miR-4811核心启动子内;(3)USF1作为激活因子可直接结合上述位点激活miR-4811核心启动子上调双荧光素酶报告基因转录表达。研究结果揭示了USF1参与调节microRNA基因转录表达的机理,并为后续USF1/miR-4811调节轴参与调控鹿茸再生发育机制提供了重要基础数据。